毛发毒品检测——胶体金免疫层析法

毛发毒品检测——胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析技术作为一种应用于各种快速诊断领域的技术，早已成为继20世纪80年代继三大标记技术后发展起来的固相标记免疫测定技术。

免疫胶体金技术（immune colloidal gold technique）是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，涉及的技术还有免疫膜层析技术；有关毒品检测胶体金的试剂盒有三联体、五联体及附带荧光等。

胶体金免疫技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的免疫标记技术。金标免疫检测试纸条系统使用一种特殊的多孔膜（NC膜）作为固相载体，该膜具有很强的蛋白吸附功能，抗体抗原吸附于NC膜并经干燥处理后即作为固相，可与液相中的相应标记了胶体金的抗原抗体快速结合。

将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。

以毒品检测三联试剂盒为例进行解析：在试剂盒内放置了吗啡、甲基安非他明、氯胺酮三条检测卡，在检测卡的检测区(T线)分别包被了吗啡、甲基安非他明、氯胺酮的载体结合物，另一端固定有吗啡、甲基安非他明、氯胺酮单克隆抗体胶体金纸片。

检测时，如果处理后毛发中含有吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)及代谢物，它们将与吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)载体结合物共同竞争标记在胶体金上的抗体结合位点，当它们浓度达到产品设计的阈值浓度以上时，会首先与胶体金纸片上的吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)单克隆抗体反应并占据抗体全部的结合位点，这样就阻止了胶体金上吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)抗体和膜上检测区的吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)结合，检测区不能捕获到胶体金颗粒而没有红色色带呈现，为阳性结果。

如果处理后样本中没有吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)或浓度低于阈值浓度，则胶体金上吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)抗体将和膜上检测区的吗啡(或甲基安非他明或氯胺酮)载体结合物结合，检测区捕获到胶体金颗粒而呈现红色色带，为阴性结果。

毛发验毒初筛技术（胶体金）的优点在于检测简便、费用低、灵敏度高，可以用为前期广筛的技术；然而毛发初筛检测毒品的种类少，新型毒品的种类不断增多，相对而言检测范围很难与时俱进，只能做到毒品种类的初步定性，不能进行精确定量分析。